Red Española de Microscopía Óptica Avanzada
Leica Laser Scanning Confocal TCS-SP5 Laser Scanning Confocal Microscope
 
Universidad Autónoma de Madrid (UAM), Servicio Interdepartamental de Investigación (SIdI) UAM - Microscopia Confocal SIdI-UAM
 
Lab contact
 
 
Institution:
  • Universidad Autónoma de Madrid (UAM)
Center:
  • Servicio Interdepartamental de Investigación (SIdI) UAM
 
Address
Universidad Autonoma de Madrid. Facultad de Medicina
C/ Arzobispo Morcillo, 2 28029 Madrid Spain
Tel. +34 91 497 54 82 / Fax. +34 91 497 53 41
 
 
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Lab members
 
 
Mª Dolores Morales
 
 
 
Equipment description
 

Con Láser Diodo azul 405nm, láser de Argón (458, 476, 488, 496, 514 nm), láser DPSS 561nm y láser de Helio-Neón (594, 633nm). Cuatro canales de detección internos de ancho de banda y longitud de onda ajustables y un detector externo de iluminación transmitida para imágenes de campo claro.

Además de estar equipado con un escáner convencional, presenta un escáner adicional de resonancia para adquirir imágenes rápidas y, un divisor de haz acústico óptico (AOBS) especial para adquirir varios colores simultáneamente.
Los objetivos disponibles para este equipo son: 5X/0.15, 10X0.4, 20X/0.7 MULTIINMERSIÓN CORR LAMBDA BLUE (corrección cromática especial en el rango azul para aplicaciones con proteínas fluorescentes), 40X/1.25-0.75 OIL, 63X/1.4-0.6 OIL CORR LAMBDA BLUE, 63X/1.3 GLY (con distancia de trabajo de 280 μm, para muestras gruesas).
Platina motorizada, con cámara termostatizada con CO2 y humedad adecuada para experimentos in vivo
Posibilidad de: zoom electronico, rotación del haz de barrido,
Adquisición de imágenes multidimensionales hasta 8D: x,y,z,t,α,λ,i,d (área imagen, altura, tiempo, rotación, longitud de onda, intensidad, situación en xy o tile scan)
Estudios espectrales de cálculo de emisión de un fluorocromo o autofluorescencia desconocida, eliminación del cruce entre fluorocromos con emisión solapante.
 
Other info
 
  • Análisis tridimensional de muestras biológicas: inmunofluorescencia en células, tejidos, organismos completos de cierto tamaño, biofilms, etc. Con posibilidad de trabajar las secciones ópticas tanto horizontal (xyz) como verticalmente (xzy).
  • Estudios de colocalización de hasta cinco marcadores que emitan en el rango del ultravioleta, visible e infrarrojo. Así como de internalización y tránsito intracelular.
  • Análisis de expresión génica, interacción molecular y otros procesos celulares.
  • Hibridación in situ con sondas fluorescentes (FISH).
  • Experimentos in vivo y a tiempo real mediante marcadores o proteínas de fusión fluorescentes (como por ejemplo, la GFP): Time-lapse, medida de iones intracelulares (análisis fisiológico de Ca2+), estudios en 4D.
  • Reconstrucción automática de grandes estructuras a partir de software (experimentos de Tile scan), ya que ambos equipos disponen de platina motorizada (tanto para experimentos in vivo, como para muestras fijadas).
  • Estudios de adquisición simultánea o secuencial de diferentes zonas de la misma muestra o distintos pocillos de una misma preparación en 2D, 3D y 4D (experimentos de Mark and Find y Time-lapse).
  • Estudios de lambda scan para la detección espectral lo que permite obtener: las curvas de autofluorescencia de diferentes muestras, los espectros de emisión de los fluoróforos, si se desconocen y, eliminar o minimizar problemas de solapamiento de espectros.
  • Estudio de interacciones entre proteínas mediante la técnica FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer). Modos: Acceptor Photobleaching y Sensitized Emission.
  • Estudio de transporte de proteínas mediante la técnica FRAP (Fluorescence Recovery After Photo-bleaching) y sus variantes: iFRAP (Inverse), FLIP (Fluorescence Loss in Photobleaching).
  • Captación de imágenes con contraste de fase.
  • En determinados materiales permite la obtención de imágenes de su superficie mediante reflexión y posterior análisis de superficies, rugosidad, etc.
 
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