Red Española de Microscopía Óptica Avanzada
Leica TCS-SP2 Laser Scanning Confocal Microscope
 
Universidad Autónoma de Madrid (UAM), Servicio Interdepartamental de Investigación (SIdI) UAM - Microscopia Confocal SIdI-UAM
 
Lab contact
 
 
Institution:
  • Universidad Autónoma de Madrid (UAM)
Center:
  • Servicio Interdepartamental de Investigación (SIdI) UAM
 
Address
Universidad Autónoma de Madrid. Facultad de Medicina
C/ Arzobispo Morcillo, 2 28029 Madrid Spain
Tel. +34 91 497 54 82 / Fax. +34 91 497 53 41
 
 
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Lab members
 
 
Mª Dolores Morales
 
 
 
Equipment description
 
Con seis líneas de láser en el espectro visible (458, 476, 488, 514, 561 y 633 nm) y dos líneas en el de ultravioleta (351, 364 nm). Tres canales de detección internos de ancho de banda y longitud de onda ajustables y un detector externo de iluminación transmitida para imágenes de campo claro.
Objetivos disponibles: 5X/0.15, 10X/0.4, 20X/0.7 OIL, 40X/1.25-0.75 OIL, 63X/1.4-0.6 OIL, 100X1.4-0.7 OIL.
Platina motorizada, con posibilidad de montaje de cámara termostatizada con CO2 para experimentos in vivo
Posibilidad de: zoom electronico, rotación del haz de barrido,
Adquisición de imágenes multidimensionales hasta 8D: x,y,z,t,?,?,i,d (área imagen, altura, tiempo, rotación, longitud de onda, intensidad, situación en xy o tile scan)
Estudios espectrales de cálculo de emisión de un fluorocromo o autofluorescencia desconocida, eliminación del cruce entre fluorocromos con emisión solapante.
 
Other info
 
  • Análisis tridimensional de muestras biológicas: inmunofluorescencia en células, tejidos, organismos completos de cierto tamaño, biofilms, etc. Con posibilidad de trabajar las secciones ópticas tanto horizontal (xyz) como verticalmente (xzy).
  • Estudios de colocalización de hasta cinco marcadores que emitan en el rango del ultravioleta, visible e infrarrojo. Así como de internalización y tránsito intracelular.
  • Análisis de expresión génica, interacción molecular y otros procesos celulares.
  • Hibridación in situ con sondas fluorescentes (FISH).
  • Experimentos in vivo y a tiempo real mediante marcadores o proteínas de fusión fluorescentes (como por ejemplo, la GFP): Time-lapse, medida de iones intracelulares (análisis fisiológico de Ca2+), estudios en 4D.
  • Reconstrucción automática de grandes estructuras a partir de software (experimentos de Tile scan), ya que ambos equipos disponen de platina motorizada (tanto para experimentos in vivo, como para muestras fijadas).
  • Estudios de adquisición simultánea o secuencial de diferentes zonas de la misma muestra o distintos pocillos de una misma preparación en 2D, 3D y 4D (experimentos de Mark and Find y Time-lapse).
  • Estudios de lambda scan para la detección espectral lo que permite obtener: las curvas de autofluorescencia de diferentes muestras, los espectros de emisión de los fluoróforos, si se desconocen y, eliminar o minimizar problemas de solapamiento de espectros.
  • Estudio de interacciones entre proteínas mediante la técnica FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer). Modos: Acceptor Photobleaching y Sensitized Emission.
  • Estudio de transporte de proteínas mediante la técnica FRAP (Fluorescence Recovery After Photo-bleaching) y sus variantes: iFRAP (Inverse), FLIP (Fluorescence Loss in Photobleaching).
  • Captación de imágenes con contraste de fase.
  • En determinados materiales permite la obtención de imágenes de su superficie mediante reflexión y posterior análisis de superficies, rugosidad, etc.
 
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